1、了解旋光仪的构造和旋光度的测定原理

2、掌握旋光仪的使用方法和比旋光度的计算方法

理解定义；了解影响因素；了解测定意义；了解碳水化合物的变旋光现象；思考本实验中如何保护旋光仪。

当一束单一的平面偏振光通过手性物质时，其振动方向会发生改变，此时光的振动面旋转一定的角度，这种现象称为旋光现象。物质的这种使偏振光的振动面旋转的性质叫做旋光性，具有旋光性的物质叫做旋光性物质或旋光物质。许多天然有机物都具有旋光性。由于旋光物质使偏振光振动面旋转时，可以右旋（顺时针方向，记做“+”）,也可以左旋（逆时针方向，记做“—”），所以旋光物质又可分为右旋物质和左旋物质。

由单色光源（一般用钠光灯）发出的光，通过起偏棱镜（尼可尔棱镜）后，转变为平面偏振光（简称偏振光）。当偏振光通过样品管中的旋光性物质时，振动平面旋转一定角度。调节附有刻度的检偏镜（也是一个尼可尔棱镜），使偏振光通过，检偏镜所旋转的度数显示在刻度盘上，此即样品的实测旋光度α。

常用比旋光度来表示物质的旋光性，比旋光度和旋光度的关系如下：

纯液体的比旋光度

溶液的比旋光度

上两式中， 表示旋光性物质在温度为t℃、光源的波长为λ时的比旋光度；α为旋光仪所测得的旋光度；l为液层厚度（dm）；d 为纯液体的密度；c为溶液的浓度（g/ml）；t为测定时的温度（℃）；λ为所用光源的波长（nm）。例如25℃用波长为589nm的钠灯（D线）作光源测定某样品的旋光度为右旋38°，则比旋光度记作[α]25D=+38°。

比旋光度是旋光性物质的物理常数之一。通过测定旋光度，可以鉴定物质的纯度、测定溶液的浓度、密度和鉴别光学异构体。

旋光仪、洗瓶、胶头滴管、滤纸；

蒸馏水、5%葡萄糖溶液、未知浓度的葡萄糖溶液

旋光度可以由旋光仪来测定。旋光仪有两种：一种是数字自动显示测定结果的自动旋光仪，另一种是目测刻度而得结果圆盘旋光仪，

准确称取一定量的样品，在50ml的容量瓶中配成溶液。通常可以选用水、乙醇、氯仿作溶剂。若用纯液体样品直接测试，则测定前只需确定其相对密度即可。

由于葡萄糖溶液具有变旋光现象，所以待测葡萄糖溶液应该提前24小时配好，以消除变旋光现象，否则测定过程中会出现读数不稳定的现象。

打开旋光仪电源开关，预热5～10分钟，待发出钠黄光后方可观察使用。

在测定样品前，必须先用蒸馏水来调节旋光仪的零点。洗净样品管后装入蒸馏水，使液面略凸出管口。将玻璃盖沿管口边缘轻轻平推盖好，不要带入气泡，旋紧（随手旋紧不漏水为止，旋得太紧，玻片容易产生应力而引起视场亮度发生变化，影响测定准确度）上螺丝帽盖。将样品管擦干后放入旋光仪，合上盖子。开启钠光灯，将刻度盘调在零点左右，会出现大于或小于零度视场的情况。旋动粗动、微动手轮，使视场内三部分的亮度一致，即为零点视场。记下刻度盘读数，重复调零4~5次取平均值。若平均值不为零而存在偏差值，应在测量读数中将其减去或者加上。

a.大于或小于零度视场 b.零度视场 c.小于或大于零度视场

样品的测定和调零方法相同。每次测定之前样品管必须先用蒸馏水清洗1~2遍，再用少量待测液润洗2～3次遍，以免受污物的影响，然后装上样品进行测定。旋动刻度盘，寻找较暗照度下亮度一致的零度视场。若读数是正数为右旋；读数是负数为左旋。读数与零点值之差，即为样品在测定温度时的旋光度。记下测定时样品的温度和样品管长度。测定完后倒出样品管中溶液，用蒸馏水把管洗净，擦干放好。

按以上方法测定5%葡萄糖溶液的旋光度4~5次，测定值填入下表相应位置。再测定未知浓度的葡萄糖溶液的旋光度4~5次，测定值填入下表相应位置。

按表中设计的项目进行相应处理，最终求出未知浓度葡萄糖溶液的浓度。

* 差值 = 旋光度平均值 － 零点平均值

1．对观察者来说，偏振光的振动平面若是顺时针旋转，则为右旋（+），这样测得的+α，也可以代表α ±（n×180）°的所有值。如读数为+38°，实际上还可以是218°、398°、-142°等角度。因此，在测定未知物的旋光度时，至少要做一次改变浓度或者液层厚度的测定。如观察值为+38°，在稀释五倍后，所得读数为+7.6°，则此未知物的旋光度α应该为+7.6°×5=+38°。

2．仪器应放在空气流通和温度适宜的地方，并不宜低放，以免光学零部件、偏振片与受潮发霉及性能衰退。

3. 试管使用后，应及时用水或蒸馏水冲洗干净，揩干藏好。

4. 镜片不能用不洁或硬质布、纸去揩，以免镜片表面产生道子等。

5. 仪器不用时，应将仪器放入箱内或用塑料罩罩上，以防灰尘侵入。

6. 仪器、钠光灯管、试管等装箱时，应按规定位置放置，以免压碎。

7. 不懂装校方法，切勿随便拆动，以免由于不懂校正方法而无法装校好。

1．旋光度的测定具有什么实际意义？

2．浓度为10%的某旋光性物质，用1dm长的样品管测定旋光度，如果读数为 -6°，那么如何确定其旋光度是-6°还是+354°？

3．为什么在样品测定前要检查旋光仪的零点？通常用来做零点检查液的溶剂应符合哪些条件？

4．使用旋光仪有哪些注意事项？