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甲苯胺红不加热血清试验 我有新说法
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甲苯胺红不加热血清试验(tolulized red unheated serum test,TRUST)是一种非梅毒螺旋体抗原血清试验,主要用于梅毒的筛选和疗效观察。

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甲苯胺红不加热血清试验简介

梅毒是一种由梅毒螺旋体( TP)引起全身各器官的性传播疾病,当梅毒螺旋体进入人体3~ 6周后,可在患者血清中检出2种抗体, 一种是针对螺旋体抗原的抗体,另一种是针对非螺旋体抗原的抗体。临床梅毒检测常用的血清学试验分为非梅毒螺旋体抗原试验( 如VDRL,TRUST,RPR)和梅毒螺旋体抗原试验( 如TPPA,ELISA等)[1]
梅毒螺旋体感染人体后,宿主迅速对螺旋体表面的脂质作出免疫应答,在3~4周产生抗类脂质抗原的抗体(反应素),此时TRUST试验可呈阳性。

甲苯胺红不加热血清试验基本原理

用正常牛心肌的心类脂(Cardiolipin 二磷酸酰甘油衍生物)作为抗原,而不是用螺旋体作为抗原,来测定病人血清中的反应素(非特异性抗体---抗心磷脂抗体)。用来初步筛查梅毒螺旋体感染。 反应素在初期梅毒病灶出现后1~2周就可测出,在二期梅毒滴度,三期梅毒较低[2]

甲苯胺红不加热血清试验操作程序

1. 仪器材料:
1.1 水平旋转仪
1.2 试剂盒:TRUST抗原液,直径为18mm圆圈的卡片,抗原滴管,针头
2. 样本采集:
2.1 抽取静脉血,室温静止凝固后,分离新鲜血清。也可以用冻存的血清
2.2 血浆: 各种抗凝剂制备的血浆
3. 操作步骤:
3.1 定性试验:
3.1.1 加样:吸取50μL样本放在卡片圆圈中,并均匀的涂布在整个圈内。
3.1.2 加抗原:将TRUST抗原轻轻摇匀,用9号针头(60滴/mL)加一滴抗原。
3.1.3 将卡片置水平旋转仪上旋转8分钟(100±2转/分钟),立即在亮光下观察结果。
3.2 定量试验:
3.2.1稀释液准备:在圆圈内加入50μL生理盐水(根据确定稀释度),勿将盐水涂开。
3.2.2加样:吸取50μL样本与各圈内盐水作系列稀释,并涂布整个圈内。
3.2.3 加抗原, 同上
3.2.4将卡片置水平旋转仪上旋转8分钟(100±2转/分钟),立即在亮光下观察结果。
4. 结果判读:
凝集反应强度分级:
3+ ~ 4+:圆圈内出现中到大的红色絮状物,液体清亮
2+:圆圈内出现小到中的红色絮状物,液体较清亮
2+:圆圈内出现小的黑色絮状物,液体浑浊
- :圆圈内仅见甲苯胺红颗粒集中于一点或均匀分散
5. 结果报告:
5.1 定型试验:
5.1.1 阳性:出现1+ ~ 4+强度的凝集反应
5.1.2 阴性:不产生凝集反应
5.2 定量试验:
滴度:出现凝集反应的血清稀释倍数

甲苯胺红不加热血清试验临床意义

TRUST试验适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检查。由于所用抗原不具有特异性,除梅毒病人外,一些非梅毒疾患也可暂时或长期地存在反应素。例如麻风、结核、传染性单核细胞增多症、红斑狼疮、类风湿性关节炎、雅司、回归热、以及一些发热性疾病。此外,在孕妇、老年人和吸毒者有生物学假阳性反应。对未经治疗的一期、二期和潜伏梅毒患者的敏感性分别为:86%、99%、98%。[3]

甲苯胺红不加热血清试验与其他方法的比较

TRUST法适用于梅毒筛查,其定量试验可作为疗效评价,但风湿、红斑狼疮患者可与之发生交叉反应。
TP-ELISA 双抗原夹心法敏感性高于TRUST, RPR 法,价格低, 且操作简单方便, 仪器操作规范,便于资料保存,适用于样本量大的体检及流行病学的调查[4]
TPPA方法特异性好,适用于梅毒筛查后阳性标本的确证, 不宜作为梅毒筛查及疗效判断。
WHO推荐用VDRL和RPR 法对血清进行过筛试验,出现阳性者用TPPA, TPHA 等方法做确证试验。
RPR法和TRUST法存在不同程度的假阳性,从医疗单位避免医疗纠纷和患者减少心理压力及家庭矛盾两方面考虑,标本的检测采用ELISA 和TRUST双法筛查,阳性标本再用TPPA方法进行生物学假阳性甄别[5]
参考资料


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