目前以核受体为靶点的药物筛选法存在操作繁琐、纯配体需要量大、无法对复杂成分直接进行筛选等问题。受细胞膜色谱法启示，可尝试将核受体组装在生物模板上，采用高效生物色谱法来对核受体靶点药物进行筛选。DNA折纸术的出现使得这一想法成为可能，其构建的“纳米模板”作为生物大分子载体，能寻址组装蛋白质分子，刚性强、稳定性好。基于此，本研究提出“DNA折纸色谱法”的概念。这一新的生物色谱方法，能精确实现核受体在高度有序模板上的定向组装，固定相具有优良的力学性能、生物相容性和较长使用寿命，对于复杂天然产物中活性成分也能快速进行测定。过氧化物酶体增殖物激活受体γ亚型（PPARγ）是多种疾病的重要治疗靶点。本研究拟将核受体PPARγ组装在短管状DNA折纸上，并与硅胶键合，制备核受体PPARγ组装DNA折纸色谱；以人参皂苷为模型药物，为PPARγ靶点药物的开发提供一个特异性强、稳定性好、简便高效的筛选新方法。

以核受体为靶点的传统药物筛选法存在操作繁琐、纯配体需要量大、无法对复杂成分直接进行筛选等问题。本课题尝试将核受体组装在生物模板上，采用高效生物色谱法来对核受体靶点药物进行筛选。DNA折纸能精确组装蛋白质分子，刚性强、稳定性好。因此，本课题构建DNA折纸色谱模型，用于复杂天然产物中药效组分的筛选。本研究以过氧化物酶体增殖物激活受体γ亚型（PPARγ）为治疗靶点，主要研究内容包括三部分。①核受体PPARγ组装DNA折纸生物色谱柱的研制。提取大量M13mp18单链DNA和重组hPPARγ-LBD蛋白，并进行了表征；在PCR仪上，加入M13mp18单链DNA及128条订书钉链进行折叠，得长方形DNA折纸纳米生物模板；将核受体蛋白hPPARγ-LBD组装在DNA折纸上，并键合巯基化硅胶，制得核受体PPARγ组装DNA折纸色谱固定相；采用高压匀浆法，将自制的固定相装填于不锈钢色谱柱中。②核受体PPARγ组装DNA折纸色谱模型的建立及评价。构建以自制生物色谱柱为药物筛选核心的HPLC模型，考察其亲和特性及选择特异性。③核受体PPARγ组装DNA折纸色谱模型筛选中药人参活性成分的研究。采用HPLC法和HPLC/MS法，以人参总皂苷为研究对象，筛选其中与核受体PPARγ蛋白具有亲和作用的组分，从而确定了中药人参中具有药效作用的活性成分。实验结果发现，自制DNA折纸生物色谱柱性能良好，且可专属性地识别PPARγ受体阳性药物——；成功构建核受体PPARγ组装DNA折纸生物色谱药物筛选模型，并筛选出人参皂苷Re为人参皂苷中主要的药效组分。本研究为PPARγ靶点药物的开发提供了一个特异性强、稳定性好、简便高效的筛选新方法，并可为其他胞内受体靶点药物的筛选提供新的思路和方法。^[1]